药学论文_海洋细菌Thalassomonas sp.LD5中新型
文章目录
1 仪器、材料与方法
1.1 菌株、试剂与仪器
1.2 实验方法
1.2.1 TsAly7C基因序列分析
1.2.2 TsAly7C重组表达载体构建、表达和纯化
1.2.3 酶活力的测定
1.2.4 rTsAly7C的酶学性质研究
1.2.5 rTsAly7C的降解方式和降解产物研究
2 实验结果
2.1 TsAly7C序列分析结果和蛋白信息
2.2 重组Ts Aly7C的蛋白纯化结果
2.3 重组TsAly7C的酶学性质研究结果
2.4 rTsAly7C的降解方式和降解产物研究结果
3 讨论
文章摘要:目的对来源于Thalassomonas sp.LD5的褐藻胶裂解酶TsAly7C进行研究,以期获得具有优良性质的褐藻胶裂解酶,适应工业需求。方法在生物信息学分析的基础上,对TsAly7C进行了重组表达和酶学性质研究。结果通过生物信息学分析,TsAly7C属于PL7家族的第一亚家族。对重组TsAly7C(r TsAly7C)酶学性质进行分析,r TsAly7C的最适温度是30℃,最适p H为8.0(Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液),在底物中添加300 mmol/L NaCl时降解能力最强。r TsAly7C的p H稳定性和温度稳定性较好,在0~30℃保存1 h仍保有80%以上的酶活,是1种适低温性褐藻胶裂解酶。Cu2+、Co2+、Zn2+、Ni2+和十二烷基硫酸钠(SDS)对r TsAly7C的酶活有明显的抑制作用。r TsAly7C是1种双功能褐藻胶裂解酶,以内切形式裂解褐藻胶产生不饱和二糖和单糖。
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